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-醋酸-酒精固定液(faa)50%或70%酒精90ml 冰醋酸5ml (37%~40%甲醛)5ml可用作固定植物的一般組織,但不適用于單細(xì)胞及絲狀藻類,細(xì)胞固定液,也不適宜作細(xì)胞學(xué)研究。幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,可防止材料收縮。若材料堅(jiān)硬,可略減冰醋酸,略增。若材料易收縮,染色固定液,可稍增加冰醋酸。久置時(shí)另加入5ml甘油以防蒸發(fā)和材料變硬。此液又可作保存液。固定時(shí)間10h。如果用在植物胚胎的材料上,改用下面的配方,效果較好:50%酒精89ml 冰醋酸6ml 5ml。
固定劑先應(yīng)用在光學(xué)顯微技術(shù)中,但光學(xué)顯微鏡中使用的沉淀凝集蛋白性的固定劑對電鏡并不特別適用。于是人們引入和中性甲醛進(jìn)行固定。早期的電鏡生物樣品化學(xué)固定法都采用單一固定,但不能很好地保存糖原和其它碳水化合物,而且在組織中的滲透速度比較慢(約2mm/h)。電鏡中使用的固定劑都*性,操作時(shí)都要很小心,盡可能在通風(fēng)櫥中完成操作。如果實(shí)驗(yàn)室中發(fā)生固定劑泄漏,必須立即用大量奶粉覆蓋泄漏出來的溶液,待反應(yīng)充分后收集處理。
固定液的選擇:一般采取相似相溶原則1、分離非*性物質(zhì)時(shí),選用非*性固定液,標(biāo)本固定液,非*性大的后出峰,小的先出峰2、分離*性物質(zhì)時(shí),選用*性固定液,*性大的后流出,小的先流出3、*性與非*性混合液時(shí),選擇*性固定液,武漢固定液,*性大的后出峰,小的先出峰4、對于氫鍵型的物質(zhì),選擇*性或者氫鍵型固定液,不易形成氫鍵的先流出色譜柱,反之則反5、分離復(fù)雜的難分離物質(zhì),可選用兩種或兩種以上的混合固定液。
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